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線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性檢測(cè)試劑盒

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法

注意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
貨號(hào)：BC3240
規(guī)格：25T/12S

產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 支，-20℃保存；
試劑三：液體 3mL×1 瓶，4℃保存；

產(chǎn)品說明：
線粒體復(fù)合體Ⅲ（EC 1.10.2.2）又稱 CoQ-細(xì)胞色素 C 還原酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分，負(fù)責(zé)把還原型 CoQ 的氫傳遞給細(xì)胞色素 C，生成還原型細(xì)胞色素 C。與氧化型細(xì)胞色素 C 不同，還原型細(xì)胞色素 C 在 550nm 有特征光吸收，因此 550nm 光吸收增加速率能夠反映線粒體復(fù)合體Ⅲ酶活性。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

操作步驟：
一、復(fù)合體Ⅲ的提取：
① 稱取約0.1g組織或收集500萬細(xì)胞，加入1.0 mL提取液，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
② 4 ℃ 600 g離心10min。
③ 將上清液移另一離心管中，4 ℃ 11000 g離心15min。
④ 上清液即胞漿提取物，可用于測(cè)定從線粒體泄漏的復(fù)合體Ⅲ（此步可選做，可以判斷線粒體提取效果）。
⑤ 在沉淀中加入200uL提取液，超聲波破碎（功率20％，超聲5秒，間隔10秒，重復(fù)15次），用于復(fù)合體Ⅲ酶活性測(cè)定，并且用于蛋白含量測(cè)定。

二、測(cè)定步驟：
1. 可見分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)550nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 工作液的配制：臨用前把試劑二轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解，用不完的試劑4℃可保存一周；

相關(guān)文獻(xiàn)：

《Trimetazidine restores the positive adaptation to exercise training by mitigating statin‐induced skeletal muscle injury》 作者:Ming Song , Fang‐fang Chen , Yi‐hui Li,  Lei Zhang , Feng Wang,  Ran‐ran Qin  ,Zhi‐hao Wang , Ming Zhong , Meng‐xiong Tang , Wei Zhang , Lu Han 期刊:Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle 影響因子:10.754 PMID:29152896
《Weanling Offspring of Dams Maintained on Serine-Deficient Diet Are Vulnerable to Oxidative Stress》 作者:Liuqin He, Haiwen Zhang, and Xihong Zhou 期刊:Oxidative Medicine and Cellular Longevity 影響因子:4.868 PMID:30305866
《A Damaged Oxidative Phosphorylation Mechanism Is Involved in the Antifungal Activity of Citral against Penicillium digitatum》 作者:Qiuli OuYang, Nengguo Tao* and Miaoling Zhang 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.259 PMID:29503638
《Age-dependent expression of the Vitamin D receptor and the protective effect of Vitamin D receptor activation on H2O2-induced apoptosis in rat intervertebral disc cells》 作者:TongTonga1ZhihuiLiub1HuaZhangcJingleiSuncDongxiaZhangdFengWangaDechaoMiaoaYongShen 期刊:Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology 影響因子:3.785 PMID:30905826
《Roles of TRPA1 and TRPV1 in cigarette smoke -induced airway epithelial cell injury model》 作者:Muyun Wang,Yanbei Zhang,Mengmeng Xu,HaiZhang,Yuqing Chen,Kian Fan Chung,Ian M.Adcock,Feng Li 期刊:Free Radic. Biol. Med. 影響因子:5.657 PMID:30639616
《Nitrogen-doped graphene quantum dots (N-GQDs) perturb redox-sensitive system via the selective inhibition of antioxidant enzyme activities in zebrafish.》 作者:Shun Deng,Ailing Fu,Muhammad Junaid,Yan Wang,Qian Yin,Chen Fu,Li Liu,Dong-Sheng Su,Wan-Ping Bian,De-Sheng Pei 期刊:Biomaterials 影響因子:10.273 PMID:30925289

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