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E1171 EDTA脫鈣液 （PH7.2）

摘要：EDTA脫鈣液的原理是螯合鈣離子，保存EDTA脫鈣液的方法是常溫保存，組織脫鈣實(shí)驗(yàn)常用的EDTA脫鈣液的方法時(shí)間較長，同時(shí)對(duì)組織損傷也較小。常用的EDTA脫鈣液的PH值是7.2

一，EDTA脫鈣液 （PH7.2）包裝簡介：（附表） 
貨號(hào)：E1171
規(guī)格：100ml/500ml
保存：常溫保存，有效期1年。

二，原理以及優(yōu)缺點(diǎn)：
    一些組織內(nèi)含有骨質(zhì)或鈣化物時(shí)，含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因?yàn)殁}和石蠟之間的密度不同，較難切除完整的切片。對(duì)含鈣組織好固定之后，再進(jìn)行脫鈣或二者同時(shí)進(jìn)行。然后進(jìn)行下游的實(shí)驗(yàn)，如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多，脫鈣劑包括有機(jī)酸、無機(jī)酸、乙二胺四乙酸（EDTA）以及電解法脫鈣。
EDTA 是一種相對(duì)較好的螯合脫鈣劑，對(duì)組織結(jié)構(gòu)影響小，可以較好的保存組織的某些酶類，經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進(jìn)行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢，一般脫需要數(shù)周數(shù)月。
Solarbio EDTA 脫鈣液優(yōu)點(diǎn)：①經(jīng)EDTA 脫鈣的組織染色結(jié)果好；②對(duì)組織的結(jié)構(gòu)損害??；③用化學(xué)方法測試可以確定脫鈣的終點(diǎn)。
Solarbio EDTA 脫鈣液缺點(diǎn)：①脫鈣速度很慢，不適合常規(guī)標(biāo)本脫鈣使用；②脫鈣后組織會(huì)稍微變硬。
三，操作步驟：
1，骨組織脫鈣時(shí)，取材不易過厚，一般大約5mm。
2，組織固定后，用PBS 清洗3 次，每次20min。
3，組織用蒸餾水洗清洗3 次，每次20min。
4，組織轉(zhuǎn)移20～30 倍體積的EDTA 脫鈣液中，脫鈣10～30 天或更長時(shí)間。如果想加快脫鈣速度，可以置于37℃進(jìn)行脫鈣。如果必要，更換新的EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣，多數(shù)組織脫鈣2 周～3 個(gè)月即可，每周更換一次，直終點(diǎn)。亦可采用微波快速脫鈣法：微波爐設(shè)在200W左右的檔位，每次加熱5min，依據(jù)組織厚度和密度重復(fù)3～5min，中間間隔3～5min。
5，用蒸餾水沖洗數(shù)次。
6，常規(guī)脫水、包埋。
四，脫鈣實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1，厚度5mm 的骨組織塊脫鈣時(shí)間一般脫鈣10~30 天即可。
2，適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度，一般不應(yīng)超過37～40℃，溫度過高容易使骨組織造成松散解體，尤其不可大于60℃。
3，脫鈣應(yīng)*，防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時(shí)盡量縮短脫鈣時(shí)間，以免脫鈣過長引起組織損害。
4，脫鈣用具避免使用金屬容器，盡量使用玻璃容器。
5，骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時(shí)進(jìn)行，不應(yīng)先脫鈣后固定，以便減少組織的損傷程度。
6，每隔一段時(shí)間檢測一次脫鈣程度，避免脫鈣過度，脫鈣過度會(huì)增加組織的損傷程度，影響染色結(jié)果。
7，為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
五，脫鈣實(shí)驗(yàn)中的一些小技巧：
脫鈣終點(diǎn)的測定（物理法）：采用針刺、手掐、鉗夾等方法，當(dāng)骨組織變軟或針刺時(shí)沒有阻力感即可終止脫鈣。物理檢測法會(huì)對(duì)組織結(jié)構(gòu)有一定的損害， 盡量避免用力過大或反復(fù)檢測。

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