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產品名稱:蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒

產品型號:PC0010

產品報價:

產品特點:蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒
貨號:PC0010
規(guī)格:2500T
保存:開封使用后請密封保存,本試劑盒自訂購之日起九個月內有效。

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PC0010蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒的詳細資料:

蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒
貨號:PC0010
規(guī)格:2500T
保存:開封使用后請密封保存,本試劑盒自訂購之日起九個月內有效。

 

產品內容:

組成 包裝(2500 微孔)保存
5×G250 染色液100ml2-8℃
PBS 稀釋液30ml 2-8℃
蛋白標準(5mg/ml BSA)1ml-20℃

 

產品簡介:
    考馬斯亮蘭 G-250 染料,在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的大吸收峰的位置(Imax),由 465nm 變?yōu)?595nm,在一定的濃度范圍內,測定的吸光度值 A595 與蛋白質濃度成正比。Bradford 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響,樣品中巰基乙醇的濃度可高達 1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達 5mM,但受略高濃度的去垢劑影響,需確保 SDS 的濃度低于 0.1%,Triton X-100 低于 0.1%,Tween 20, 60, 80 低于 0.06%。
    含去垢劑的樣品推薦使用索萊寶生產的 BCA 蛋白濃度測定試劑盒。


操作說明:
一.微孔酶標儀法
    1.  *溶解蛋白標準品,取 10ul,稀釋 250ul ,使終濃度為 0.2mg/ml。待測蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋標準品。
    2.  5×G250 染色液使用前請顛倒 3-5 次混勻, 取 1ml 5×G250 染色液, 加入 4ml 雙蒸水, 混勻成 1×G250染色液,此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周。
    3.  將標準品按 0,2,4,6,8,12,16,20 微升分別加到 96 孔板中,加 PBS 稀釋液補足到 20 微升。
    4.  將樣品作適當稀釋(好多做幾個梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀釋),加 20 微升到 96 孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線 1/2 后。
    5.  各孔加入 200 微升稀釋后的 1×G250 染色液,室溫放置 3-5 分鐘。
    6.  用酶標儀測定 A595,或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度。
    7.  根據(jù)標準曲線計算出樣品中的蛋白濃度。


二.分光光度計法
    如無酶標儀,染色反應可在離心管中進行,反應液混勻后加入比色皿中,使用分光光度計測定吸光值。


步驟如下:
    1.  取八支(或者更多)干凈的 10ml 離心管,標記上號。
    2.  取 100ulBSA 加入 PBS 2.4ml 稀釋終濃度為 0.2mg/ml。
    3.  5×G250 染色液使用前請顛倒 3-5 次混勻,取 10ml 5×G250 染色液,加入 40ml 雙蒸水,混勻成 1×G250 染色液,此 1×G250 染色液可在 4℃保存一周。
    4.  按下表加入試劑(以每孔 5ml 計,多余的用來清洗比色皿)

     5. 反應 3 分鐘后測 OD 值。為了實驗的準確性,可每間隔 2 分鐘加一管染色液,每間隔 2 分鐘測一管 OD值。如下表:

 


相關產品:

PC0001 BSA 標準品( 5mg/ml )
PC0015 5×G250( 蛋白定量用 )
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PR1600  預染低分子量蛋白 MARKER
R0050  核蛋白抽提試劑盒

 

蛋白定量 Bradford蛋白濃度測定試劑盒

 

 

參考文獻:
《Cetuximab and Doxorubicin loaded dextran-coated Fe3O4 magnetic nanoparticles as novel targeted nanocarriers for non-small cell lung cancer》 作者:Qinlu Zhang,Qian Liu,Menghan Du,Yali Cui,Lixia Zhang,Lili Guo,Le Ma,Mingwei Chen, 期刊:Journal of Magnetism and Magnetic Materials 影響因子:3.046 PMID:

《The critical roles of exposed surface residues for the thermostability and halotolerance of a novel GH11 xylanase from the metagenomic library of a saline-alkaline soil》 作者:Zhongyuan,Li,Xiumei Li,Tianhui Liu,Shiheng Chen,Huihui Liu,Hui Wang,Kun Li,Yajian Song,Xuegang Luo,Junqi Zhao,Tongcun Zhang 期刊:International Journal of Biological Macromolecules 影響因子:4.784 PMID:30986455

 

 

 

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