脂肪酶(LPS)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品名稱: 脂肪酶(LPS)活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: Lipase(LPS) Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC2340          產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣       產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：420
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: 脂肪酶檢測試劑盒|LPS檢測試劑盒|脂肪酶|試劑盒

簡要介紹：
LPS 又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中 LPS 的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。 
    LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率，即可計算 LPS 活性。
 
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體80mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，室溫保存。
試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：0.06mL×1支。臨用前加入1.5 mL無水乙醇，充分溶解配制成125 µmol/mL的油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，4℃保存。用前注意解凍溶解。

產(chǎn)品說明：
LPS又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。
LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測定脂肪酸生成速率，即可計算LPS活性。

自備儀器和用品：
    研缽、臺式離心機、震蕩混勻器、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、甲苯、無水乙醇、冰和蒸餾水。

操作步驟：
一、粗酶液提取：   
組織樣品：稱取約0.1g樣品，加試劑一1.0 mL充分研磨，于4℃，15000rpm離心30min，取上清液待測。
血清樣品：直接檢測。
二、測定步驟：

1. 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長710nm，甲苯調(diào)零。
2. 試劑一和試劑二置于37℃水浴預(yù)熱30min以上。
3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋：將125 µmol/mL的油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋為125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9 µmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液待測。
4. 操作表：

反復(fù)震蕩混勻；室溫4000rpm離心10 min，小心吸取上層溶液800 μL，加入1mL玻璃比色皿，于710nm處測定吸光值。記為A空白管，A測定管，A標(biāo)準(zhǔn)管，計算ΔA測定= A測定管-A空白管，ΔA標(biāo)準(zhǔn)= A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。
三、LPS活性計算：

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：以油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，ΔA標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b。將ΔA測定帶入方程，得到x（µmol/mL）
2. 酶活計算：

（1）按蛋白濃度計算：
活性單位定義：37℃中每毫克蛋白每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (U/mg prot) =x×V樣÷（Cpr×V樣) ÷T= 0.1×x÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
活性單位定義：37℃中每克組織每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (U/g 鮮重) =x×V樣÷（W×V樣÷V提) ÷T= 0.1×x÷W
（3）按血清計算：
活性單位定義：37℃中每毫升血清每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個酶活單位。
LPS (U/mL 血清) =x÷T= 0.1×x。
V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，0.2 mL；Cpr：上清液蛋白質(zhì)濃度，mg/mL，需要另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒；T：催化反應(yīng)時間，10 min。W：樣本鮮重，g；V提：提取液體積，1mL。
注意事項：
1、甲苯有毒，實驗過程中需佩戴手套和口罩。
2、實驗過程中須遠離火源。
3、當(dāng)吸光度大于1時，建議將樣本稀釋后測量。


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