β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品名稱(chēng): β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名: β-glucosidase（β-GC） Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC2560               產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣             產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：650
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: β-葡萄糖苷酶檢測(cè)試劑盒|β-GC檢測(cè)試劑盒|β-葡萄糖苷酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
β-GC（EC 3.2.1.21）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化β-糖苷鍵水解，具有多方面生理作用：在纖維素的糖化作用中，β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯類(lèi)香氣前驅(qū)體，使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味；β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷，釋放HCN，從而防止昆蟲(chóng)取食。
β-GC分解對(duì)-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基ben酚，后者在400nm有大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算β-GC活性。


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50ml×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×2瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入10ml雙蒸水，充分溶解備用；用不完的試劑仍-20℃保存。
試劑二：液體25ml×1瓶，4℃保存。
試劑三：液體80ml×1瓶，4℃保存。  
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1ml×1支，取1.5ml EP管加入1ml，5μmol/ml的對(duì)硝基ben酚溶液。


產(chǎn)品說(shuō)明：
β-GC（EC 3.2.1.21）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化β-糖苷鍵水解，具有多方面生理作用：在纖維素的糖化作用中，β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯類(lèi)香氣前驅(qū)體，使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài)。從而產(chǎn)生香味；β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷，釋放HCN，從而防止昆蟲(chóng)取食。
β-GC分解對(duì)-硝基ben-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基ben酚，后者在400nm有大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算β-GC活性。

需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣品的前處理：   

1. 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3、標(biāo)準(zhǔn)樣品的準(zhǔn)備：取100μL標(biāo)準(zhǔn)液，加入到400μL試劑三中，得到1μmol/ml標(biāo)準(zhǔn)液，十倍稀釋到100nmol/ml，倍比稀釋?zhuān)?0、25、12.5、6.25nmol/ml，稀釋液用試劑二。100、50、25、12.5、6.25nmol/ml做標(biāo)準(zhǔn)液。
二、測(cè)定步驟：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)400nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 加樣表

β- GC 活力單位的計(jì)算： 
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)建立：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度（y）和吸光度（x），建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
2、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，將ΔA（x）帶入公式計(jì)算樣品產(chǎn)物濃度（nmol/ml）。
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白在每ml每小時(shí)產(chǎn)生1nmol對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
β-GC活力(U/mg prot)=(y×V反總)÷(V樣×Cpr)÷T=20×y÷Cpr
需要另外測(cè)定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織在每ml每小時(shí)產(chǎn)生1nmol對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
β-GC活力(U/g鮮重) = (y×V反總)÷(W×V樣÷V樣總)÷T=20×y÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每ml每小時(shí)產(chǎn)生1nmol對(duì)-硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
β-GC活力(U/10⁴ cell)=(y×V反總)÷(500×V樣÷V樣總)÷T=0.04×y
Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；V反總：反應(yīng)體系總體積，1ml；V樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1ml；V樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣品質(zhì)量，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500萬(wàn)；T：反應(yīng)時(shí)間，0.5h。

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相關(guān)文獻(xiàn)：
《Lactobacillus casei Strain Shirota Enhances the In Vitro Antiproliferative Effect of Geniposide in Human Oral Squamous Carcinoma HSC-3 Cells》 作者:Yu Qian ，Jia-Le Song ，Peng Sun ，Ruokun Yi ， Honglin Liu ， Xia Feng ， Kun-Young Park  and Xin Zhao 期刊:Molecules 影響因子:3.06 PMID:29751513