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產(chǎn)品名稱:pCDH-CMV-Nluc-P2A-copGFP-T2A-Puro 載體

產(chǎn)品型號:VT008160

產(chǎn)品報價:

產(chǎn)品特點:pCDH-CMV-Nluc-P2A-copGFP-T2A-Puro 載體
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VT008160pCDH-CMV-Nluc-P2A-copGFP-T2A-Puro 載體的詳細資料:

pCDH-CMV-Nluc-P2A-copGFP-T2A-Puro 載體   pCDH-CMV-Nluc-P2A-copGFP-T2A-Puro 載體

產(chǎn)品簡介:
一、擴增流程
1. 收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20ul無菌水溶解質(zhì)粒,室溫放置1min;
2. 從-80°C冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記;
3. 取2ul質(zhì)粒加至100ul感受態(tài)中,冰浴30min;
4. 42°C熱激90s,再冰浴2min;
5. 加入900ul無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min;
6. 6000rpm離心5min,棄掉多余上清,僅留100ul上清,用槍頭輕輕吹打混勻菌體沉淀;
7. 混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;
8. 將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;
9. 挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒。
注: 如果第二天轉(zhuǎn)化平板長的過多,請將質(zhì)粒按比例稀釋后再轉(zhuǎn)化


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